无菌操作都是相对的，没有绝对的无菌操作，无菌和染菌是一个概率问题，我们要把染菌的概率降低到最小，就能实现无菌培养。

所有可能染菌的情况和相应的解决办法： 

1. 进气过滤器坏掉了，打开过滤器夹套，查看过滤器是否有明显的裂缝，是否有发酵物料的堆积，是否有其他杂质，是否有积水排不干净！ 

2. 发酵罐有地方漏，保持正压，用肥皂泡检测，一把情况如果整个发酵过程中保持正压，即便有漏点，也问题不大，尾气排气就是很大的一个 孔。但是进罐管道是绝对不能有漏点的！ 

3. 发酵罐中死角，这一点比较重要，所有开口的地方，都要排查，拧下来，用酒精擦洗。

4. 机封，漏油，这个一般不可能出现 

5. 发酵灭菌操作

小发酵罐 灭菌不存在节约能源的问题，特别是好些小发酵罐不需要蒸汽接触，因此发酵灭菌相对容易，但还是有些地方容易出问题：

（1）蒸汽开过猛，发酵罐假压力出现，特别是对于蒸汽进罐的发酵罐，加热过快，出口流量低，罐压迅速上升，而管内冷空气没有排除干净。

（2）灭菌没有开搅拌，物料热传递效率慢，形成假压力，可以在温度升到90℃，多维持一会，有些时候为了保护电机，在温度升到100℃以上就会停止搅拌。 

（3）蒸汽进罐不分主次，也容易出现假压力，特别是有些不该主要进蒸汽的地方，比如管道在液面以上的蒸汽进口，小罐一般不存在这个进口。 

（4）存在没有灭到的地方，这一点对于刚接触发酵罐的新手比较容易发生，可以把握一句话：所有进罐和出罐的管道阀门在灭菌的时候都必须是烫手的，可以用手试探一下！ 

（5）蒸汽进和尾气阀门避免过大幅度调节，在灭菌阶段，过快调节，会出现压力波动较大，起泡沫等现象。 

（6）尽量避免泡沫过多，泡沫过多容易灭菌不彻底 

（7）物料，对于容易结块的物料一定要注意操作，不能使其在罐内结块，小罐可以在外面提前溶解，再加进去！

（8）空气过滤器灭菌不彻底，根据发酵罐不同，要看蒸汽过滤器是否和发酵罐一起灭，是否有管道存在漏灭的地方，有没有吹干。