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Contamination des fermenteurs de laboratoire et solutions correspondantes

Post on 2025-06-30

Toutes les manipulations stériles sont relatives ; il n'existe pas de manipulation stérile absolue. L'asepsie et la contamination sont des questions de probabilité : nous devons minimiser la probabilité de contamination pour réaliser une culture stérile.

Tous les cas de contamination potentiels et les solutions correspondantes: 

1. Dépannage du filtre d'entrée d'air : Ouvrir la douille du filtre pour vérifier s'il présente des fissures apparentes, des accumulations de matière fermentée, d'autres impuretés ou des eaux stagnantes indrainables.

2. Fuites du fermenteur : Maintenir une pression positive et utiliser du savon pour détecter les fuites. En général, si la pression positive est maintenue tout au long de la fermentation, même en cas de fuite, le problème reste limité (notamment grâce au système d'évacuation du gaz). Cependant, les tuyaux d'entrée du fermenteur ne doivent en aucun cas présenter de fuites.

3. Zones mortes dans le fermenteur : Ce point est crucial. Toutes les ouvertures doivent être inspectées, dévissées et nettoyées avec de l'alcool.

4. Joint rotatif (sécrétion d'huile) : Ce problème est généralement rare.

5. Opérations de stérilisation du fermenteur

La stérilisation des petits fermenteurs ne vise pas à économiser del'énergie, notamment lorsque la stérilisation ne nécessite pas une expositiondirecte à la vapeur. Cependant, certains points peuvent poser des problèmes:

(1) Vapeur injectée trop vivement : provoquant une pression fausse dans le fermenteur, particulièrement lorsque la vapeur est injectée directement. Un chauffage trop rapide avec un débit de sortie bas fait monter brusquement la pression, tandis que l'air froid restant dans les tuyaux n'est pas entièrement évacué.

(2) Agitation non activée lors de la stérilisation : ralentit le transfert thermique des matières, provoquant une pression fausse. Conseiller de maintenir la température à 90°C pendant un certain temps. Parfois, pour protéger le moteur, l'agitation est arrêtée lorsque la température dépasse 100°C.

(3) Distribution inégale de la vapeur : peut également entraîner une pression fausse, en particulier si la vapeur est injectée inappropriément (par exemple, dans des tuyaux situés au-dessus du niveau de la solution ; ce problème est rare chez les petits fermenteurs).

(4) Zones non stérilisées : fréquent chez les débutants. Règle d'or : tous les tuyaux et vannes d'entrée/sortie doivent être 烫手 (chauds au toucher) pendant la stérilisation.

(5) Régulation excessive des vannes d'entrée de vapeur et d'évacuation : lors de la stérilisation, une régulation trop rapide peut provoquer des fluctuations de pression et la formation de mousse.

(6) Surproduction de mousse : augmente le risque de stérilisation incomplète.

(7) Traitement des matières : pour les matières susceptibles de former des grumeaux, éviter leur accumulation dans le fermenteur (pré-dissoudre en dehors du fermenteur avant ajout).

(8) Stérilisation incomplète du filtre à air : vérifier si le filtre est stérilisé conjointement avec le fermenteur, s'il existe des zones non stérilisées dans les tuyaux, et si le filtre est correctement séché.